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抑菌圈測(cè)量?jī)x觀察出現(xiàn)抑菌圈破裂的調(diào)整方式
更新時(shí)間：2019-01-29 文章更新于2019-01-29 點(diǎn)擊次數(shù)：2719次
抑菌圈法是衡量殺菌防霉劑效果的一種方式，主要用于測(cè)定殺菌防霉劑對(duì)細(xì)菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用，是定性或半定量的方法。通過(guò)殺菌防霉劑在瓊脂平板上的擴(kuò)散能力來(lái)初步篩選更有效的殺菌防霉劑品種。抑菌圈測(cè)量?jī)x測(cè)量是微生物分析的經(jīng)典方法。它是利用抑菌物質(zhì)在涂布特定試驗(yàn)菌的瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)成球形立體狀擴(kuò)散，抑制試驗(yàn)菌的繁殖，在抑菌物質(zhì)的周圍形成透明圈，即抑菌圈。在抑菌圈測(cè)量?jī)x試驗(yàn)過(guò)程中，抑菌圈出現(xiàn)破裂或呈卵圓形、橢圓形等不正常形狀時(shí)，可以從以下幾個(gè)方面進(jìn)行分析和調(diào)整：
1.鋼管兩端面不夠平，使抗生素漏出，破壞了均勻擴(kuò)散現(xiàn)象。雙碟底面不平或制備瓊脂培養(yǎng)基平板時(shí)工作臺(tái)不水平，可造成基層厚度不均勻，因此應(yīng)選擇加工相同的鋼管，兩端面不同的切勿混用；挑選底平的雙碟，調(diào)整工作臺(tái)的水平。
2.玻璃雙碟、鋼管、鋼管放置器等被抗生素液污染，會(huì)使抑菌圈破裂，有時(shí)甚至使試驗(yàn)菌被抑制，因此，在整個(gè)試驗(yàn)中要嚴(yán)格防止抗生素污染。
3.在制備瓊脂培養(yǎng)基菌層時(shí)，培養(yǎng)基溫度過(guò)高或受熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，可造成試驗(yàn)菌部分被殺死或全部被殺死，使抑菌圈破裂甚至無(wú)菌。控制方法是根據(jù)菌種要求不同，將培養(yǎng)基均勻降溫，溫度平衡后，再加入試驗(yàn)菌。
4.在滴加抗生素溶液至鋼管內(nèi)時(shí)，毛細(xì)滴管口易濺出溶液滴在瓊脂培養(yǎng)基表面，不易覺(jué)察，影響抑菌圈，因此滴加溶液時(shí)毛細(xì)滴管內(nèi)不得有氣泡，避免管口太細(xì)，毛細(xì)滴管距離鋼管口不應(yīng)太高。
5.瓊脂培養(yǎng)基上鋼管間隔距離太小而抑菌圈較大時(shí)，會(huì)形成互相影響的卵圓形或橢圓形的抑菌圈。調(diào)整抑菌圈的直徑可解決此問(wèn)題。如：增加菌層培養(yǎng)基內(nèi)的試驗(yàn)菌量；降低抗生素溶液的濃度；調(diào)整稀釋抗生素用的緩沖液的PH值或鹽濃度；調(diào)整培養(yǎng)基的配方。
6.雙碟培養(yǎng)過(guò)程中，溫度不均勻，雙碟上細(xì)菌生長(zhǎng)速度不一致，造成抑菌圈小或不圓，影響抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)的擴(kuò)散系數(shù)。因此在細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)使用水浴恒溫培養(yǎng)箱，保證受熱均勻。
1.鋼管兩端面不夠平，使抗生素漏出，破壞了均勻擴(kuò)散現(xiàn)象。雙碟底面不平或制備瓊脂培養(yǎng)基平板時(shí)工作臺(tái)不水平，可造成基層厚度不均勻，因此應(yīng)選擇加工相同的鋼管，兩端面不同的切勿混用；挑選底平的雙碟，調(diào)整工作臺(tái)的水平。
2.玻璃雙碟、鋼管、鋼管放置器等被抗生素液污染，會(huì)使抑菌圈破裂，有時(shí)甚至使試驗(yàn)菌被抑制，因此，在整個(gè)試驗(yàn)中要嚴(yán)格防止抗生素污染。
3.在制備瓊脂培養(yǎng)基菌層時(shí)，培養(yǎng)基溫度過(guò)高或受熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，可造成試驗(yàn)菌部分被殺死或全部被殺死，使抑菌圈破裂甚至無(wú)菌。控制方法是根據(jù)菌種要求不同，將培養(yǎng)基均勻降溫，溫度平衡后，再加入試驗(yàn)菌。
4.在滴加抗生素溶液至鋼管內(nèi)時(shí)，毛細(xì)滴管口易濺出溶液滴在瓊脂培養(yǎng)基表面，不易覺(jué)察，影響抑菌圈，因此滴加溶液時(shí)毛細(xì)滴管內(nèi)不得有氣泡，避免管口太細(xì)，毛細(xì)滴管距離鋼管口不應(yīng)太高。
5.瓊脂培養(yǎng)基上鋼管間隔距離太小而抑菌圈較大時(shí)，會(huì)形成互相影響的卵圓形或橢圓形的抑菌圈。調(diào)整抑菌圈的直徑可解決此問(wèn)題。如：增加菌層培養(yǎng)基內(nèi)的試驗(yàn)菌量；降低抗生素溶液的濃度；調(diào)整稀釋抗生素用的緩沖液的PH值或鹽濃度；調(diào)整培養(yǎng)基的配方。
6.雙碟培養(yǎng)過(guò)程中，溫度不均勻，雙碟上細(xì)菌生長(zhǎng)速度不一致，造成抑菌圈小或不圓，影響抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)的擴(kuò)散系數(shù)。因此在細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)使用水浴恒溫培養(yǎng)箱，保證受熱均勻。
